کروماتوگرافی مایع(HPLC)

کروماتوگرافی مایع(HPLC) از انواع کروماتوگرافی است که فاز متحرک در آن مایع است. کروماتوگرافی گازی نیز روش دیگری است که در آن فاز متحرک گاز است. اگر فاز متحرک گاز و فاز ساکن مایع باشد، روش را کروماتوگرافی گاز-   مایع می‌نامند. روش‌های کروماتوگرافی گاز- جامد، مایع- مایع و مایع- جامد  نیز وجود دارند.

کروماتوگرافی مایع(HPLC) یکی از پرکاربردترین محصولات کروماتوگرافی است. کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا HPLC تکنیکی جهت آنالیز شیمیایی برای جداسازی، تشخیص و تعیین مقدار اجزای یک مخلوط می باشد. در محصولات کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا HPLC، پمپ‌هایی قراردارد که با ایجاد فشار قوی، حلال مایع را از مخلوط نمونه از طریق ستون بسیار ریز حاوی مواد جاذب جامد عبور می دهد.

کروماتوگرافی مایع(HPLC) هر جزء نمونه با تفاوت جزئی از بقیه، با ماده جاذب واکنش می‌دهد که باعث اختلاف سرعت‌های جریان برای اجزای متفاوت شده و باعث جدا کردن اجزا در ستون می شود. کروماتوگرافی HPLC کاربردی وسیع در پژوهش‌های مختلف علوم پایه دارد. در روش‌های مختلف کروماتوگرافی یک فاز متحرک ( Mobile phase ) و یک فاز ثابت ( Stationary phase ) وجود دارد. فاز ثابت می‌تواند جامد  یا مایع  و فاز متحرک مایع یا گاز باشد.

کروماتوگرام ، نموداری از پاسخ آشکارساز بر حسب زمان، حجم فاز متحرک یا  فاصله است. اطلاعات مفیدی نظیر میزان پیچیدگی نمونه، تعداد اجزاء موجود در نمونه، مشخصات کیفی اجزای نمونه، درک کمی از درصد گونه‌ها موجود در نمونه و  مشخصه‌های کارایی سادگی از کروماتوگرام قابل حصول هستند.

در HPLC اغلب از ستون‌های پر شده با ذرات ریز فاز ساکن استفاده می‌شود. به  همین علت سطح بیشتری از فاز ساکن در ستون در معرض اجزاء نمونه قرار می‌گیرد  و در نتیجه راندمان جداسازی در این روش بیشتر از سایر روش‌های کروماتوگرافی       است.

در سیستم HPLC با استفاده از یک سوزن مخصوص وارد پیش ستون مربوطه می‌شود.  هم‌ زمان از یک حلال مخصوص جهت ترکیب شدن با نمونه استفاده می‌شود. سپس  نمونه با حلال مورد نظر ترکیب شده و وارد ستون مربوطه می شود و بر اساس  میزان قطبیت حلال و ترکیب از یکدیگر جدا می‌شوند. همچنین نمونه بر اساس زمان بازداری از یکدیگر تفکیک می‌شوند.

کاربردها کروماتوگرافی مایع(HPLC):

• 1- جداسازی، خالص سازی و شناسائی پروتئین ها و ترکیبات آلی بویژه ترکیبات داروئی. همچنین در برخی از آزمایش های مربوط به تعیین غلظت داروها مورد       استفاده قرار می گیرد
• 2-در تحقیقات پروتومیک (تحقیقاتی که برروی پروتئین ها انجام می شود)، آنالیز و هضم پروتئین
• 3-تعیین ساختار پلیمرها
• 4-مقایسه ساختارهای پروتئین های مختلف

اجزای دستگاه کروماتوگرافی مایع(HPLC):

• پمپ
• انژکتور
• ستون
• آشکار ساز
• کنترل کننده
• گازگیر

الفاظ مورد استفاده مکرر درکروماتوگرافی مایع(HPLC):

• فاز متحرک Mobile Phase
• فاز ثابت
• نمونه
• زمان بازداری Retention Time
  برای خرید این کالا باماتماس بگیرید.