کیت رنگ امیزی زیل نلسون 1سری

برخی از باکتری ها (باسیل سل ,,جذام و برخی از جنس های نوکاردیا )به واسطه دارا بودن میزان بالایی از چربی به آسانی به روش های معمولی رنگ آمیزی نمی شوند بلکه برای این امر به یک رنگ و حرارت قوی و زمان بیشتری جهت نفوذ رنگ به داخل پیکرشان نیاز دارند.به واسطه این نوع رنگ آمیزی این باکتری ها حتی توسط اسیدهای معدنی و یا اسید الکل رنگ زدایی نمی شوند که به همین جهت واژه اسید فست به آنها اطلاق می گردد.این خاصیت اجاززه می دهد که باکتری ها حتی به تعداد کم در گسترش رنگ شده قابل تشخیص باشند.ترتیب رنگ آمیزی زیل نلسون به قرار زیر است:

۱- یک گسترش ضخیم و یکنواخت از نمونه تهیه و آن را در هوا خشک کرده و سپس توسط شعله فیکس نمایید.

۲- یک کاغذ صافی به ابعاد ۲*۴ سانتی متر یا کمی کوچکتر از لام فراهم کنید.این کاغذ بایستی اسمیر (گسترش ) را بپوشاند تا از رسوب رنگ روی جلوگیری کند.

۳- تمام سطح گسترش را با کربول فوشین (رنگ بازی ) زیل نلسون بپوشانید و به آرامی از سطح زیرین لام توسط شعله حرارت دهید.در زمان حرارت دادن لام بایستی میزان حرارت آنقدر باشد که سطح لام فقط بخار بلند شود و نبایستی رنگ روی لام بجوشد و یا خشک شود در صورتی که به علت حرارت و بخار شدن رنگ میزان رنگ کاهش یابد می توان مجددا روی لام رنگ اضافه کرد

۴- زمان تأثیر رنگ روی گسترش ۵ دقیقه است بعد از آن کاغذ را برداشته و لام را با آب بشویید

۵- توسط اسید الکل رنگ زدایی کنید یا از محلول مزبور آنقدر روی لام قطره قطره می ریزند تا آخرین قطره خارج شده از روی لام شفاف باشد.

۶- از رنگ آبی متیلن به مدت ۳۰ تا ۶۰ ثانیه روی گسترش بریزید

۷- لام را شسته در هوا خشک کنید و با عدسی روغنی به مطالعه پردازید

در این رنگ آمیزی باکتری سل به صورت باسیل ظریف و قرمز رنگی در زمینه آبی مشخص می شود

نحوه استفاده از کیت رنگ آمیزی زیل نلسون

گسترده میکروبی را تهیه و پس از خشک شدن به کمک حرارت تثبیت کنید
سطح نمونه را با کاربول فوشین بپوشانید
لام پوشیده از رنگ را به مدت 5 دقیقه به کمک چراغ الکلی به آرامی حرارت دهید به صورتی که رنگ به جوش نیاید و خشک نشود
نمونه را با آب بشوئید
نمونه را با اسید الکل به مدت یک دقیقه بی رنگ کنید
نمونه را با آب بشویید
نونه را با متیلن بلو به مدت 30 ثانیه رنگ کنید
نمونه را با آب شسته و خشک کنید

ش کرد و روش رنگ آمیزی پیچیده ای را برای قابل رؤیت کردن این باکتری ها شرح داد. روش حاضر شیوۀ قابل اطمینان و مؤثری را برای رنگ آمیزی باکتری های اسید فست عرضه می کند. این نوع از باکتری ها میزان بالایی چربی در دیواره سلولی دارند و به روش‌های معمول قابل رنگ آمیزی نیستند. افزون بر کاربردهای آموزشی، مهمترین کاربرد بالینی این کیت رنگ آمیزی، تشخیص باکتری Mycobacterium tuberculosis در نمونه های خلط و پس از آن تشخیص کیست های Cryptosporidium و Isospora است.