کریستال ویوله MERCK

کدهای ایمنی: R۲۲, R40, R۴۱, R50/53

ابقه و هدف: از خصوصيات مهم نايسرياها، مقاومت در برابر ماده رنگي كريستال ويوله است. هدف از اين مطالعه، بررسي اثر كريستال ويوله بر رشد اين باكتري ها، افزودن آن به محيط كشت جهت جداسازي اين باكتري ها، و ساخت يك محيط كشت اختصاصي براي نايسريا است.
روش بررسي: اقدامات انجام شده عبارتند از: 1) ترشحات مجراي 106 بيمار مرد مبتلا به اورتريت، بر روي محيط هاي New York City Medium Agar (NYC agar)، آگار شكلاتي، و آگار شكلاتي داراي غلظت هاي كريستال ويوله در حد فاصل 1:100000 تا 1:250000 كشت داده و لام گرم تهيه شد. 2) ترشح حلق 230 فرد سالم، بر روي محيط هاي آگار خوندار، آگار شكلاتي و نيز آگار شكلاتي حاوي غلظت هاي متفاوت كريستال ويوله در حد فاصل 1:50000 تا 1:500000 كشت داده و لام گرم تهيه گرديد. 3) براي بررسي احتمال رشد سوش استاندارد ATCC گونوكوك در حضور كريستال ويوله، باكتري در محيط هاي آگارشكلاتي، آگارخوندار، مولرهينتون آگار، تايرمارتين آگار و نيز در همين محيط ها، همراه نسبت هاي 1:50000 تا 1:200000 كريستال ويوله كشت داده شد.
يافته ها: 69 نفر از 106 بيمار مبتلا به اورتريت، مشكوك به سوزاك بودند كه كشت 64 نفر از آنان در محيط NYC، از نظر گونوكوك، مثبت بود. حاصل رشد اين نمونه ها، در محيط آگار شكلاته، 54 مورد مثبت (با حساسيت %84 نسبت به محيط NYC) همراه باكتري هاي مختلف فلور نرمال بود. بيشترين و مناسبترين رشد، در آگار شكلاتي حاوي كريستال ويوله به نسبت 1:150000، 58 مورد مثبت (با حساسيت %91 نسبت به محيط NYC) و با حداقل رشد فلور نرمال همراه بود. ترشح حلق 228 نفر از 230 فرد سالم، از نظر نايسريا، مثبت بود. اين نايسرياها، قادر به رشد در حداقل 1:500000 و حداكثر 1:50000 غلظت كريستال ويوله بودند. با اين تفاوت كه در غلظت 1:500000، باكتري هاي فلور طبيعي نيز رشد كامل داشته و با افزايش تدريجي غلظت، از رشد آنها كاسته شد تا اينكه در غلظت نهايي 1:50000، فقط نايسريا رشد كرده بود. در آزمايش مستقيم اين نمونه ها نيز در 228 مورد ديپلوكوك هاي گرم منفي نايسريا فرم مشاهده شده بود. نتيجه كشت نايسريا گونوره آي استاندارد بر روي محيط هاي آگار شكلاته، مولرهينتون و تايرمارتين، همراه مقادير مختلف كريستال ويوله و نيز بدون آن عبارت است از: در همه محيط هاي بدون كريستال ويوله، رشد اين نمونه بطور كامل و يكسان مشاهده شد؛ در حالي كه در محيط هاي حاوي كريستال ويوله، حداقل تعداد كولوني، در غلظت 1:50000 و حداكثر 1:200000 مشاهده گرديد.
نتيجه گيري: براي جداسازي و تشخيص نايسرياهاي بيماريزايي مانند گونوكوك مي توان از محيط اختصاصي كروموژن مانند آگار شكلاتي حاوي 1:150000 كريستال ويوله يا يكي از محيط هاي تاير مارتين و مولرهينتون حاوي 1:200000 كريستال ويوله استفاده نمود. نايسرياهاي بي آزار، مقاومت زيادي به اين ماده داشته و در غلظت 1:50000، در هريك ازمحيط هاي فوق، قابل رشد و جداسازي هستند. براي ساخت انبوه محيط كروموژن، با توجه به وزن پودر و غلظت هاي ذكر شده مي توان ميزان پودر كريستال ويوله لازم را محاسبه و با پودر اوليه هريك ازاين محيط ها بطور هوموژن مخلوط نمود.